5M氢氧化钠3ml，依次加入带冷凝管的500ml三口烧瓶中，搅拌下缓缓升温至反应温度达75℃。滴加环氧乙烷，以HPLC监测反应终点。接近终点时停止滴加环氧乙烷，继续在上述温度下反应到终点。用盐酸酸化到pH值为2，放置18h，加少量活性碳过滤，滤液置水浴上真空浓缩以回收甲醇，除去水，残余物干燥得粗品36.5g，重量收率121.7%，三羟乙基芦丁含量74.2%。经甲醇结晶，得浅黄色片状晶体24.8g，重量收率67.9%，三羟乙基芦丁含量90.9%。总重量收率82.6%。

　　1.3  三羟乙基芦丁的HPLC含量测定  HPLC［3］：SP2000高效液相色谱仪，SP-4100泵，SP-UV2000紫外检测器，色谱柱：（Agilent  SB-C18，250 mm×4.6 mm，5μm）不锈钢柱，流动相：乙腈-四氢呋喃-0.1%枸橼酸（7∶10∶76），检测波长255nm。理论板数以三羟乙基芦丁峰计应不低于2000。以三羟乙基芦丁对照品做对照，以面积归一化法测定含量。

2  实验结果

　　2.1  反应介质和最佳反应时间以及反应过程中一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁的含量变化  以氢氧化钠为催化剂、甲醇-水为混合溶剂，在反应温度为75℃，溶解性好，反应速度快，当反应时间为8～9h时，三羟乙基芦丁含量可达73%以上，接近其最高值，芦丁、一羟、二羟乙基芦丁含量接近0，四羟乙基芦丁刚开始生成，之后，三羟乙基芦丁含量迅速下降，四羟乙基芦丁含量迅速升高，所以最佳反应时间为8～9h，见图2、图3。
   
　　水为溶剂，反应开始时溶解不好，反应速度慢，反应过程中芦丁、一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁含量变化与甲醇-水为溶剂相似，最佳反应时间为15h，三羟乙基芦丁含量可达71%以上，见图4。

　　2.2  粗品的结晶  含量为74.2%的三羟乙基芦丁粗品经甲醇、乙醇、正丁醇结晶，甲醇结晶效果好，三羟乙基芦丁含量可达90.9%，收率为67.5%，为淡黄片状或颗粒，见表1。

　　表1  三羟乙基芦丁粗品经甲醇、乙醇、正丁醇的结晶结果（略）

　　3  讨论

　　三羟乙基芦丁是维脑路通的主要有效成分，具有降低毛细血管通透性和脆性，提高毛细血管抵抗力，抑制血小板聚集，防止血栓形成的作用，具有疗效确切、安全可靠、使用方便、价格低廉等特点。近些年来，又发现了三羟乙基芦丁的其他方面的作用，如保护脂质防止过氧化［4］、保护组织免受辐射的损伤［5］、治疗眼睛疲劳［6］、可吞噬自由基［7］等。越来越受到研究者的关注。

　　很难得到高纯度三羟乙基芦丁（如含量达到99%以上）产品的原因：一方面是三羟乙基芦丁的反应复杂，另一方面是结晶溶剂的选择和结晶方法等。在反应温度为75℃，以氢氧化钠为催化剂条件下，清楚地展示了反应过程中的一羟、二羟、三羟、四羟乙基芦丁的产生、变化过程。在此，三羟乙基芦丁达到最高时，四羟乙基芦丁已经开始形成，所以只能取一个最佳值。此反应过程可能也适用于其他反应溶剂。
   
　　三羟乙基芦丁的合成反应复杂，但其有一个最佳反应点，此时，三羟乙基芦丁含量最高，相对应的时间即为此条件下的最佳反应时间，这里甲醇-水为混合溶剂时，最佳反应时间为8～9h，水为溶剂时，最佳反应时间为15h。甲醇为最佳的结晶溶剂，可显著提高三羟乙基芦丁的含量。本实验为三羟乙基芦丁生产条件的控制提供了科学的根据。

　　　［参考文献］

　　1  Kvis F.Mixture of O-hydroxyethylated rutin derivatives.Czech.CS225，440，1984-10-01.

　　2  唐精桥，袁佩瑾，刘炜.曲克芦丁的制备及结构鉴定.中国医药工业杂志，1996，27（7）：291-292.

　　3  丁少纯，王美芳，徐士飞，等.利用HPLC法测定维脑路通输液中